- １ 期日
- 平成24年８月６日（月）〜11日（土） ５泊６日
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- ２ 会場
- 東京大学大学院医学系研究科疾患生命工学センター 再生医療工学部門
牛田研究室
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- ３ 指導者
- 東京大学大学院医学系研究科 牛田多加志教授（高26回卒）ほか５名のスタッフ
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- ４ 参加生徒
- 刈谷高校 ２年２名、３年３名
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- ５ 研修内容
- (1) 分化による遺伝子発現の変化
- (2) ストレッチによる遺伝子発現の変化
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- ６ 実施内容
- １日目 講義、細胞観察
- ２日目 無菌操作、細胞培養、サンプル回収
筋芽細胞(C2C12)をサンプルとし、２つの班で分化前、分化後、
分化中（物理刺激なし）、 分化中（物理刺激あり）のサンプル回収
- ３日目 ＲＮＡ抽出、ｃＤＮＡ合成
- ＲＮＡはＤＮＡの遺伝情報に基づきアミノ酸を運搬し、タンパク質を作る。
今回はｃＤＮＡ合成のためにＲＮＡを取り出した。
遺伝子の発現量を調べるうえで、ＲＮＡは変化しやすいため、
安定なＤＮＡに逆転写した。（ｃＤＮＡ合成） ＰＣＲ（遺伝子の増幅）
遺伝子の発現量をはかりやすくするために、ｃＤＮＡの量を増やした。
- ４日目 電気泳動、データ解析
データを取るためにＰＣＲにかけた遺伝子を電気泳動にかけた。
- 電気泳動後、紫外線を照射すると、ＤＮＡバンドが蛍光を帯び、
- その濃淡で遺伝子の発現量がわかった。
- 写真のデータを画像解析ソフトで解析し、バンドの濃淡を数値化した。
- ５日目 データ解析
２つの班で、結果に大きな違いが出た。
- 原因としては、実験操作にミスがあたったのではないか。
- 班ごとで別のサンプルを扱ったので、最初から遺伝子の発現量が違って
いたのではないか。
- まとめ
- 分化前と分化後の結果から、分化すると遺伝子の発現量が増えることが
わかった。
物理刺激により、遺伝子の発現量は促進されることがわかった。
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| 細胞の観察 |
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電気泳動の準備 |
